對(duì)畜禽行業(yè)來(lái)說(shuō)，白血病的爆發(fā)不啻于一場(chǎng)“浩劫”：我國(guó)花巨資購(gòu)入的艾維因品系白羽肉種雞此前本已實(shí)現(xiàn)了自繁自養(yǎng)，但因感染禽白血病而完全退出市場(chǎng)，從此完全依賴(lài)進(jìn)口；更嚴(yán)重的是，國(guó)內(nèi)自繁自養(yǎng)的蛋雞、黃羽肉雞等原種雞群也大批量感染了禽白血?。簧踔猎诎l(fā)病高峰期，每年至少有6千萬(wàn)只商品代蛋雞死亡，涉及國(guó)內(nèi)三分之二種雞公司的后代，年損失約45億元。
形勢(shì)逆轉(zhuǎn)是從一種被稱(chēng)為“克星”的新技術(shù)開(kāi)始的。科技日?qǐng)?bào)記者近日走入河北大午農(nóng)牧集團(tuán)種禽有限公司雞舍，和總經(jīng)理劉平聊起了這個(gè)企業(yè)與禽白血病的“戰(zhàn)斗”過(guò)程?！艾F(xiàn)在有了禽白血病診斷和凈化技術(shù)，禽白血病病毒在經(jīng)營(yíng)的蛋雞原種雞群中實(shí)現(xiàn)了徹底凈化，再也不用擔(dān)驚受怕了?！眲⑵介_(kāi)心地說(shuō)。
這項(xiàng)由山東農(nóng)業(yè)大學(xué)自主研發(fā)的禽白血病診斷和凈化技術(shù)，現(xiàn)已應(yīng)用于眾多養(yǎng)殖企業(yè)，從源頭切斷了疾病的傳播。目前，該診斷檢測(cè)技術(shù)被中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)、中國(guó)農(nóng)科院、農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)診斷中心等從事禽白血病研究的高校和科研機(jī)構(gòu)采用，通過(guò)檢疫切斷白血病傳播的防控模式在我國(guó)65%的祖代白羽肉雞和60%的祖代蛋雞中推廣應(yīng)用，取得了巨大的經(jīng)濟(jì)社會(huì)效益。
找出發(fā)病“元兇”
“美國(guó)多年前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了禽白血病，我國(guó)的白羽肉雞幾乎都由美國(guó)進(jìn)口。當(dāng)時(shí)我們就判斷，我國(guó)的白羽雞得的病可能就是禽白血病。”山東農(nóng)業(yè)大學(xué)崔治中教授表示。
事實(shí)證明，崔治中的推斷是正確的。崔治中團(tuán)隊(duì)在我國(guó)白羽肉雞中率先分離鑒定了J亞群禽白血病病毒（以下簡(jiǎn)稱(chēng)J病毒），并找到了有關(guān)基因組上可追溯來(lái)源的分子標(biāo)志，證實(shí)了該病毒來(lái)自美國(guó)。這也讓國(guó)內(nèi)有關(guān)公司的種禽國(guó)際貿(mào)易糾紛談判有了科學(xué)依據(jù)。
經(jīng)過(guò)深入研究，團(tuán)隊(duì)還發(fā)現(xiàn)J病毒是我國(guó)雞群白血病的主要病因。在發(fā)病嚴(yán)重的年份，我國(guó)所有白羽快大型肉雞群普遍發(fā)生J病毒感染，并且約70%市場(chǎng)份額的蛋雞種業(yè)公司被投訴。
針對(duì)該病毒的傳播原理，崔治中向記者科普道，橫向傳播，指病毒在人群中不同個(gè)體間的傳播，在特定條件下也可直接進(jìn)入血循環(huán)；垂直傳播，指通過(guò)胎*或產(chǎn)道，病毒直接由親代傳播給子代的方式，“而禽白血病是由禽白血病病毒（ALV）引起的腫瘤病，以垂直傳播為主，但又能橫向傳播，也就是種雞感染禽白血病后會(huì)傳給數(shù)量巨大的商品代雛雞，又能在孵化期時(shí)橫向傳播給其他剛出殼的小雞。按照理論，一只曾祖代雞能產(chǎn)出24萬(wàn)只商品雞，也就是如果一只曾祖代種雞感染，會(huì)造成數(shù)萬(wàn)只商品雞感染，經(jīng)濟(jì)損失可想而知?！泵鎸?duì)這一重疫病，崔治中和團(tuán)隊(duì)人員憂(yōu)心忡忡。
為此，崔治中團(tuán)隊(duì)連續(xù)多年收集保存各亞群禽白血病病毒共200余株，建立了系統(tǒng)完善的資源庫(kù)，由此也創(chuàng)新性地揭示了我國(guó)J病毒的分子演變規(guī)律，“翻出”了禽白血病病毒的“家底”。
堵住病毒“進(jìn)口”
找到元兇，下一步就是控制，但我國(guó)的曾祖代或者祖代種雞幾乎都從國(guó)外進(jìn)口，如何通過(guò)對(duì)進(jìn)口種雞進(jìn)行檢測(cè)以從源頭上避免帶進(jìn)J病毒？“在當(dāng)時(shí)，全世界都沒(méi)有針對(duì)這個(gè)新型病毒的檢測(cè)試劑。”崔治中感嘆道。
模擬抗原是*一道難關(guān)，正當(dāng)團(tuán)隊(duì)一籌莫展時(shí)，另一種病毒吸引了科研人的視線(xiàn)?！爱?dāng)時(shí)昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)剛剛興起，因?yàn)槠渌磉_(dá)的蛋白含量高，且它作為真核表達(dá)系統(tǒng)能更好的模擬抗原?！贝拗沃姓f(shuō)，通過(guò)該病毒表達(dá)系統(tǒng)為載體，很快表達(dá)出了J病毒的抗原蛋白，“緊接著，我們研制出了針對(duì)該病毒的單克隆抗體，并利用這一單克隆抗體在熒光顯微鏡下觀(guān)察到病毒的存在，建立了可用于檢測(cè)J病毒的間接免疫熒光檢測(cè)方法。”
間接免疫熒光檢測(cè)方法現(xiàn)在是一種非常常規(guī)的檢測(cè)方法，“但當(dāng)時(shí)在獸醫(yī)學(xué)的應(yīng)用較少?！眻F(tuán)隊(duì)成員趙鵬對(duì)檢測(cè)方法過(guò)程科普道，我們檢測(cè)時(shí)在所取樣品中加入針對(duì)J病毒的單克隆抗體，而這種抗體只會(huì)與J病毒結(jié)合，然后再加入熒光素標(biāo)記物，如果抗體已與病毒結(jié)合，則在專(zhuān)用熒光顯微鏡下就能看到病毒感染部位發(fā)出紅色或綠色的熒光，若沒(méi)有結(jié)合就不會(huì)看到光亮，由此判定細(xì)胞中是否存在病毒感染。整個(gè)過(guò)程簡(jiǎn)單、易操作。
在實(shí)踐中，新的診斷技術(shù)也讓國(guó)內(nèi)禽類(lèi)企業(yè)如虎添翼的同時(shí)，保證了雞禽的質(zhì)量。
北京愛(ài)拔益加家禽育種有限公司等四家公司此前一直從國(guó)外進(jìn)口AA、ROSS品系祖代肉雞種苗，在意識(shí)到了禽白血病病毒危害的嚴(yán)重性后，運(yùn)用間接免疫熒光檢測(cè)方法，在堵住禽白血病從國(guó)外到國(guó)內(nèi)的“進(jìn)口”的同時(shí)，這三家公司的種雞群很快就實(shí)現(xiàn)了禽白血病“零發(fā)生”。直到現(xiàn)在這些企業(yè)仍然是國(guó)內(nèi)種禽行業(yè)的龍頭企業(yè)。
凈化國(guó)內(nèi)“土著雞”
禽白血病“進(jìn)口”堵住了。然而之前隨進(jìn)口種雞帶入的該禽白血病病毒，已傳進(jìn)了我國(guó)幾乎所有自繁自養(yǎng)的蛋雞和黃羽肉雞等原種雞群。在沒(méi)有有效藥物或疫苗情況下，如何在這些“土著”雞群中快速、徹底凈化禽白血病病毒？
考慮到該病毒垂直傳播的特點(diǎn)，研究團(tuán)隊(duì)打算通過(guò)對(duì)種雞群進(jìn)行檢測(cè)后淘汰帶毒病雞的方式進(jìn)行凈化。然而，在家禽的哪個(gè)生長(zhǎng)階段檢測(cè)？取雞體中的什么樣品？這些又成為在研究中必須攻克的“山頭”。
適合我國(guó)原種雞場(chǎng)的禽白血病凈化集成規(guī)程此時(shí)出現(xiàn)了，解決了上述難題。該方法可在種雞生長(zhǎng)的幾個(gè)關(guān)鍵期進(jìn)行病毒檢測(cè)后，徹底淘汰帶禽白血病病毒的雞。規(guī)程中的檢測(cè)樣品包括：在種蛋孵化出殼時(shí)，技術(shù)人員采集所有雛雞胎糞；在育雛后期，采集所有雞的血液；在開(kāi)產(chǎn)初期和留種前，采集所有雞的血液和公雞精液。
“由于種蛋出殼時(shí)的雛雞*易感染病毒，病毒可能會(huì)橫向感染其他剛出殼的雛雞，想徹底清除病毒樣本必須檢測(cè)胎糞?！壁w鵬表示，除此之外，還因?yàn)椤疤ゼS檢測(cè)結(jié)果不僅可以反映這只雞的感染狀態(tài)，還能盡量減少對(duì)雛雞的應(yīng)激。從雞出殼8至10周齡時(shí)為育雛期，這個(gè)時(shí)期需要較高的溫度和營(yíng)養(yǎng)，要飼養(yǎng)在專(zhuān)門(mén)的育雛舍中，應(yīng)激反應(yīng)越小越好?！?/span>
*后，為了防止漏檢，在種雞育雛后期由育雛舍轉(zhuǎn)入育成舍時(shí)還要檢測(cè)，不把病毒帶入新雞舍，在開(kāi)產(chǎn)初期和留種前，也就是雞要“生孩子”時(shí)再進(jìn)行*后把關(guān)。
打破誤區(qū)，做到“不留死角”
此前國(guó)際禽病界和家禽育種公司一直認(rèn)為由于精子的自我校正機(jī)制等原因，禽白血病病毒并不感染精子，而公雞和母雞直接接觸才會(huì)傳染，認(rèn)為在生產(chǎn)中普遍采用人工授精的方式，不會(huì)造成禽白血病的感染。“我們證明了種公雞可經(jīng)精液將病毒傳染給母雞，并由此垂直傳播至下一代。”趙鵬說(shuō)。
“在實(shí)施禽白血病凈化過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，用感染禽白血病的公雞精液為正常母雞人工授精后，其后代群體中仍有禽白血病感染現(xiàn)象的發(fā)生。”崔治中說(shuō)，由此我們開(kāi)始懷疑公雞的精液是否也會(huì)將禽白血病病毒傳染給母雞？
一系列試驗(yàn)立刻進(jìn)行，通過(guò)給雞胚靜脈接種J病毒，待其孵化后找到感染病毒的公雞，再等它們性成熟后采集精液給母雞做人工授精，*后檢測(cè)母雞是否感染，并將該母雞產(chǎn)的蛋孵化小雞，對(duì)其進(jìn)行病毒分離，結(jié)果顯示，這種方式孵化出的小雞體內(nèi)也可以檢測(cè)出禽白血病病毒?！熬褐械某煞质呛軓?fù)雜的，精子只是其中一小部分，精子不感染病毒不代表精液中沒(méi)有病毒?！壁w鵬表示，試驗(yàn)數(shù)據(jù)證實(shí)了他們的懷疑是正確的，并進(jìn)一步挖掘出新的“真相”：公雞即使血液中沒(méi)有檢測(cè)到禽白血病病毒，但精液中卻仍可以檢測(cè)到這個(gè)病毒。新出爐的對(duì)公雞精液實(shí)施病毒分離檢測(cè)的*佳操作流程在眾多雞禽類(lèi)企業(yè)試驗(yàn)后，數(shù)據(jù)顯示雞群的禽白血病感染率進(jìn)一步下降。
“過(guò)去國(guó)際上一直忽略公雞在禽白血病傳播中的作用，漏檢了很多帶病種公雞，所以西方國(guó)家需用7至10年甚至更長(zhǎng)的時(shí)間才能完成凈化。而運(yùn)用了新技術(shù)，只需3至5年就能徹底凈化原種雞場(chǎng)內(nèi)的禽白血病毒?！壁w鵬表示。
這也讓國(guó)內(nèi)原種雞群禽白血病病毒凈化“不留死角”。
形勢(shì)逆轉(zhuǎn)是從一種被稱(chēng)為“克星”的新技術(shù)開(kāi)始的。科技日?qǐng)?bào)記者近日走入河北大午農(nóng)牧集團(tuán)種禽有限公司雞舍，和總經(jīng)理劉平聊起了這個(gè)企業(yè)與禽白血病的“戰(zhàn)斗”過(guò)程?！艾F(xiàn)在有了禽白血病診斷和凈化技術(shù)，禽白血病病毒在經(jīng)營(yíng)的蛋雞原種雞群中實(shí)現(xiàn)了徹底凈化，再也不用擔(dān)驚受怕了?！眲⑵介_(kāi)心地說(shuō)。
這項(xiàng)由山東農(nóng)業(yè)大學(xué)自主研發(fā)的禽白血病診斷和凈化技術(shù)，現(xiàn)已應(yīng)用于眾多養(yǎng)殖企業(yè)，從源頭切斷了疾病的傳播。目前，該診斷檢測(cè)技術(shù)被中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)、中國(guó)農(nóng)科院、農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)診斷中心等從事禽白血病研究的高校和科研機(jī)構(gòu)采用，通過(guò)檢疫切斷白血病傳播的防控模式在我國(guó)65%的祖代白羽肉雞和60%的祖代蛋雞中推廣應(yīng)用，取得了巨大的經(jīng)濟(jì)社會(huì)效益。
找出發(fā)病“元兇”
“美國(guó)多年前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了禽白血病，我國(guó)的白羽肉雞幾乎都由美國(guó)進(jìn)口。當(dāng)時(shí)我們就判斷，我國(guó)的白羽雞得的病可能就是禽白血病。”山東農(nóng)業(yè)大學(xué)崔治中教授表示。
事實(shí)證明，崔治中的推斷是正確的。崔治中團(tuán)隊(duì)在我國(guó)白羽肉雞中率先分離鑒定了J亞群禽白血病病毒（以下簡(jiǎn)稱(chēng)J病毒），并找到了有關(guān)基因組上可追溯來(lái)源的分子標(biāo)志，證實(shí)了該病毒來(lái)自美國(guó)。這也讓國(guó)內(nèi)有關(guān)公司的種禽國(guó)際貿(mào)易糾紛談判有了科學(xué)依據(jù)。
經(jīng)過(guò)深入研究，團(tuán)隊(duì)還發(fā)現(xiàn)J病毒是我國(guó)雞群白血病的主要病因。在發(fā)病嚴(yán)重的年份，我國(guó)所有白羽快大型肉雞群普遍發(fā)生J病毒感染，并且約70%市場(chǎng)份額的蛋雞種業(yè)公司被投訴。
針對(duì)該病毒的傳播原理，崔治中向記者科普道，橫向傳播，指病毒在人群中不同個(gè)體間的傳播，在特定條件下也可直接進(jìn)入血循環(huán)；垂直傳播，指通過(guò)胎*或產(chǎn)道，病毒直接由親代傳播給子代的方式，“而禽白血病是由禽白血病病毒（ALV）引起的腫瘤病，以垂直傳播為主，但又能橫向傳播，也就是種雞感染禽白血病后會(huì)傳給數(shù)量巨大的商品代雛雞，又能在孵化期時(shí)橫向傳播給其他剛出殼的小雞。按照理論，一只曾祖代雞能產(chǎn)出24萬(wàn)只商品雞，也就是如果一只曾祖代種雞感染，會(huì)造成數(shù)萬(wàn)只商品雞感染，經(jīng)濟(jì)損失可想而知?！泵鎸?duì)這一重疫病，崔治中和團(tuán)隊(duì)人員憂(yōu)心忡忡。
為此，崔治中團(tuán)隊(duì)連續(xù)多年收集保存各亞群禽白血病病毒共200余株，建立了系統(tǒng)完善的資源庫(kù)，由此也創(chuàng)新性地揭示了我國(guó)J病毒的分子演變規(guī)律，“翻出”了禽白血病病毒的“家底”。
堵住病毒“進(jìn)口”
找到元兇，下一步就是控制，但我國(guó)的曾祖代或者祖代種雞幾乎都從國(guó)外進(jìn)口，如何通過(guò)對(duì)進(jìn)口種雞進(jìn)行檢測(cè)以從源頭上避免帶進(jìn)J病毒？“在當(dāng)時(shí)，全世界都沒(méi)有針對(duì)這個(gè)新型病毒的檢測(cè)試劑。”崔治中感嘆道。
模擬抗原是*一道難關(guān)，正當(dāng)團(tuán)隊(duì)一籌莫展時(shí)，另一種病毒吸引了科研人的視線(xiàn)?！爱?dāng)時(shí)昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)剛剛興起，因?yàn)槠渌磉_(dá)的蛋白含量高，且它作為真核表達(dá)系統(tǒng)能更好的模擬抗原?！贝拗沃姓f(shuō)，通過(guò)該病毒表達(dá)系統(tǒng)為載體，很快表達(dá)出了J病毒的抗原蛋白，“緊接著，我們研制出了針對(duì)該病毒的單克隆抗體，并利用這一單克隆抗體在熒光顯微鏡下觀(guān)察到病毒的存在，建立了可用于檢測(cè)J病毒的間接免疫熒光檢測(cè)方法。”
間接免疫熒光檢測(cè)方法現(xiàn)在是一種非常常規(guī)的檢測(cè)方法，“但當(dāng)時(shí)在獸醫(yī)學(xué)的應(yīng)用較少?！眻F(tuán)隊(duì)成員趙鵬對(duì)檢測(cè)方法過(guò)程科普道，我們檢測(cè)時(shí)在所取樣品中加入針對(duì)J病毒的單克隆抗體，而這種抗體只會(huì)與J病毒結(jié)合，然后再加入熒光素標(biāo)記物，如果抗體已與病毒結(jié)合，則在專(zhuān)用熒光顯微鏡下就能看到病毒感染部位發(fā)出紅色或綠色的熒光，若沒(méi)有結(jié)合就不會(huì)看到光亮，由此判定細(xì)胞中是否存在病毒感染。整個(gè)過(guò)程簡(jiǎn)單、易操作。
在實(shí)踐中，新的診斷技術(shù)也讓國(guó)內(nèi)禽類(lèi)企業(yè)如虎添翼的同時(shí)，保證了雞禽的質(zhì)量。
北京愛(ài)拔益加家禽育種有限公司等四家公司此前一直從國(guó)外進(jìn)口AA、ROSS品系祖代肉雞種苗，在意識(shí)到了禽白血病病毒危害的嚴(yán)重性后，運(yùn)用間接免疫熒光檢測(cè)方法，在堵住禽白血病從國(guó)外到國(guó)內(nèi)的“進(jìn)口”的同時(shí)，這三家公司的種雞群很快就實(shí)現(xiàn)了禽白血病“零發(fā)生”。直到現(xiàn)在這些企業(yè)仍然是國(guó)內(nèi)種禽行業(yè)的龍頭企業(yè)。
凈化國(guó)內(nèi)“土著雞”
禽白血病“進(jìn)口”堵住了。然而之前隨進(jìn)口種雞帶入的該禽白血病病毒，已傳進(jìn)了我國(guó)幾乎所有自繁自養(yǎng)的蛋雞和黃羽肉雞等原種雞群。在沒(méi)有有效藥物或疫苗情況下，如何在這些“土著”雞群中快速、徹底凈化禽白血病病毒？
考慮到該病毒垂直傳播的特點(diǎn)，研究團(tuán)隊(duì)打算通過(guò)對(duì)種雞群進(jìn)行檢測(cè)后淘汰帶毒病雞的方式進(jìn)行凈化。然而，在家禽的哪個(gè)生長(zhǎng)階段檢測(cè)？取雞體中的什么樣品？這些又成為在研究中必須攻克的“山頭”。
適合我國(guó)原種雞場(chǎng)的禽白血病凈化集成規(guī)程此時(shí)出現(xiàn)了，解決了上述難題。該方法可在種雞生長(zhǎng)的幾個(gè)關(guān)鍵期進(jìn)行病毒檢測(cè)后，徹底淘汰帶禽白血病病毒的雞。規(guī)程中的檢測(cè)樣品包括：在種蛋孵化出殼時(shí)，技術(shù)人員采集所有雛雞胎糞；在育雛后期，采集所有雞的血液；在開(kāi)產(chǎn)初期和留種前，采集所有雞的血液和公雞精液。
“由于種蛋出殼時(shí)的雛雞*易感染病毒，病毒可能會(huì)橫向感染其他剛出殼的雛雞，想徹底清除病毒樣本必須檢測(cè)胎糞?！壁w鵬表示，除此之外，還因?yàn)椤疤ゼS檢測(cè)結(jié)果不僅可以反映這只雞的感染狀態(tài)，還能盡量減少對(duì)雛雞的應(yīng)激。從雞出殼8至10周齡時(shí)為育雛期，這個(gè)時(shí)期需要較高的溫度和營(yíng)養(yǎng)，要飼養(yǎng)在專(zhuān)門(mén)的育雛舍中，應(yīng)激反應(yīng)越小越好?！?/span>
*后，為了防止漏檢，在種雞育雛后期由育雛舍轉(zhuǎn)入育成舍時(shí)還要檢測(cè)，不把病毒帶入新雞舍，在開(kāi)產(chǎn)初期和留種前，也就是雞要“生孩子”時(shí)再進(jìn)行*后把關(guān)。
打破誤區(qū)，做到“不留死角”
此前國(guó)際禽病界和家禽育種公司一直認(rèn)為由于精子的自我校正機(jī)制等原因，禽白血病病毒并不感染精子，而公雞和母雞直接接觸才會(huì)傳染，認(rèn)為在生產(chǎn)中普遍采用人工授精的方式，不會(huì)造成禽白血病的感染。“我們證明了種公雞可經(jīng)精液將病毒傳染給母雞，并由此垂直傳播至下一代。”趙鵬說(shuō)。
“在實(shí)施禽白血病凈化過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，用感染禽白血病的公雞精液為正常母雞人工授精后，其后代群體中仍有禽白血病感染現(xiàn)象的發(fā)生。”崔治中說(shuō)，由此我們開(kāi)始懷疑公雞的精液是否也會(huì)將禽白血病病毒傳染給母雞？
一系列試驗(yàn)立刻進(jìn)行，通過(guò)給雞胚靜脈接種J病毒，待其孵化后找到感染病毒的公雞，再等它們性成熟后采集精液給母雞做人工授精，*后檢測(cè)母雞是否感染，并將該母雞產(chǎn)的蛋孵化小雞，對(duì)其進(jìn)行病毒分離，結(jié)果顯示，這種方式孵化出的小雞體內(nèi)也可以檢測(cè)出禽白血病病毒?！熬褐械某煞质呛軓?fù)雜的，精子只是其中一小部分，精子不感染病毒不代表精液中沒(méi)有病毒?！壁w鵬表示，試驗(yàn)數(shù)據(jù)證實(shí)了他們的懷疑是正確的，并進(jìn)一步挖掘出新的“真相”：公雞即使血液中沒(méi)有檢測(cè)到禽白血病病毒，但精液中卻仍可以檢測(cè)到這個(gè)病毒。新出爐的對(duì)公雞精液實(shí)施病毒分離檢測(cè)的*佳操作流程在眾多雞禽類(lèi)企業(yè)試驗(yàn)后，數(shù)據(jù)顯示雞群的禽白血病感染率進(jìn)一步下降。
“過(guò)去國(guó)際上一直忽略公雞在禽白血病傳播中的作用，漏檢了很多帶病種公雞，所以西方國(guó)家需用7至10年甚至更長(zhǎng)的時(shí)間才能完成凈化。而運(yùn)用了新技術(shù)，只需3至5年就能徹底凈化原種雞場(chǎng)內(nèi)的禽白血病毒?！壁w鵬表示。
這也讓國(guó)內(nèi)原種雞群禽白血病病毒凈化“不留死角”。
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